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定量相位成像&熒光成像

發(fā)布時間:2022-04-06 09:14:42 瀏覽量:3386 作者:Paul

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定量相位成像&熒光成像


Phasics提供一種新的定量相位成像技術(shù),不需要標(biāo)記的情況下可以觀察到活細(xì)胞吼拥,并且準(zhǔn)確的對細(xì)胞遷移倚聚,生長過程做統(tǒng)計分析。這種即插即用的相機依賴于一種橫向剪切干涉的專利技術(shù)凿可,它可以直接測量穿過細(xì)胞的光束相位惑折。這種技術(shù)的優(yōu)勢在于極大的增強了觀察細(xì)胞是的對比度授账。而且Phasics的技術(shù)通過直接測量穿過標(biāo)本光束的相位,能夠提供關(guān)于標(biāo)本的大量信息惨驶。



相較于熒光成像白热,Phasics技術(shù)不需要任何標(biāo)記,因此對于生物標(biāo)本沒有任何損壞粗卜。除此之外因為測量的是生物內(nèi)在的特性屋确,而不是標(biāo)記染色,因此Phasics的信息更加可靠续扔。最后攻臀,Phasics提供一個細(xì)胞更加完整的視圖:即使沒有染色,所有結(jié)構(gòu)也能夠清晰的顯示纱昧,這有助于更好的了解標(biāo)本及其相互作用刨啸。


溶酶體測量

然而,在某些場合下识脆,將應(yīng)該成像和Phasics技術(shù)想結(jié)合會非常有趣设联。這篇文章中,我們將定位并且測量溶酶體的相位特征存璃。將Phasics的設(shè)備連接一個常用的明場顯微鏡仑荐,使用普通的鹵素?zé)?/mark>作為光源,光源前放置一個近紅外濾光片纵东。Phasics技術(shù)雖然能夠增強所有元素的對比度粘招。但不幸的的是,多數(shù)囊泡近似圓形偎球,通過簡單的觀察無法辨認(rèn)出溶酶體和囊泡之間的區(qū)別洒扎。因為Phasics技術(shù)測量的相位信息,它是正比于樣品的折射率以及厚度的衰絮。當(dāng)所有被觀測的物體都是接近于圓形的時候袍冷,可以通過區(qū)分他們之間的折射率來辨別物體。

為了能夠區(qū)分溶酶體的相對折射率猫牡,使用一種特殊的熒光成像方法胡诗,只對溶酶體進(jìn)行染色,改變其折射率淌友。通過下圖分析可以得到煌恢,溶酶體的折射率相對于其他囊泡是有區(qū)別的。




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