熒光分析和成像技術(shù)由于具有高靈敏度和分子特異性等優(yōu)點(diǎn)被廣泛應(yīng)用在生物攀痊、化學(xué)桐腌、醫(yī)學(xué)、物理等領(lǐng)域苟径，人們可以通過熒光光譜和熒
光顯微技術(shù)來分析樣品中熒光團(tuán)的組成案站，但是現(xiàn)有的熒光分析技術(shù)絕大部分是基于對(duì)熒光強(qiáng)度的測(cè)量，所以容易受到多種因素如激發(fā)光
強(qiáng)度棘街、熒光團(tuán)濃度的影響蟆盐，從而難以進(jìn)行定量測(cè)量承边。熒光物質(zhì)的熒光壽命指的是當(dāng)其被激發(fā)光激發(fā)之后，該物質(zhì)的分子吸收能量從基態(tài)
躍遷到某個(gè)激發(fā)態(tài)石挂，再以輻射躍遷的方式發(fā)出熒光回到基態(tài)博助。激發(fā)停止之后，分子激發(fā)出的熒光強(qiáng)度降到激發(fā)最大強(qiáng)度時(shí)的1/e所需的
時(shí)間被稱為熒光壽命痹愚，它表示粒子在激發(fā).
熒光分析和成像技術(shù)由于具有高靈敏度和分子特異性等優(yōu)點(diǎn)被廣泛應(yīng)用在生物富岳、化學(xué)、醫(yī)學(xué)拯腮、物理等領(lǐng)域窖式，人們可以通過熒光光譜和熒
光顯微技術(shù)來分析樣品中熒光團(tuán)的組成，但是現(xiàn)有的熒光分析技術(shù)絕大部分是基于對(duì)熒光強(qiáng)度的測(cè)量动壤，所以容易受到多種因素如激發(fā)光
強(qiáng)度脖镀、熒光團(tuán)濃度的影響，從而難以進(jìn)行定量測(cè)量狼电。熒光物質(zhì)的熒光壽命指的是當(dāng)其被激發(fā)光激發(fā)之后蜒灰，該物質(zhì)的分子吸收能量從基態(tài)
躍遷到某個(gè)激發(fā)態(tài)，再以輻射躍遷的方式發(fā)出熒光回到基態(tài)肩碟。激發(fā)停止之后强窖，分子激發(fā)出的熒光強(qiáng)度降到激發(fā)最大強(qiáng)度時(shí)的1/e所需的
時(shí)間被稱為熒光壽命，它表示粒子在激發(fā)態(tài)存在的平均時(shí)間削祈，一般被稱為激發(fā)態(tài)的熒光壽命翅溺。
熒光壽命僅僅與熒光物質(zhì)自身的結(jié)構(gòu)和其所處的微環(huán)境的極性和粘度等條件有關(guān)，而與激發(fā)光強(qiáng)度髓抑、熒光團(tuán)濃度無關(guān)咙崎，因此通常來說是
絕對(duì)的。通過測(cè)定熒光壽命吨拍，我們可以直接了解所研究的體系所發(fā)生的變化褪猛，了解體系中許多復(fù)雜的分子間作用過程。時(shí)間相關(guān)單光子
計(jì)數(shù)法（tcspc）是目前測(cè)量熒光壽命的主要技術(shù)羹饰，其工作原理如下圖所示：
使用一個(gè)窄脈沖激光激發(fā)樣品伊滋，然后檢測(cè)樣品發(fā)出的第一個(gè)熒光光子到達(dá)光信號(hào)接收器的時(shí)間。由時(shí)幅轉(zhuǎn)化器（time-amplitude,
TAC）將該時(shí)間成比例地轉(zhuǎn)化為對(duì)應(yīng)的電壓脈沖队秩。再將該電壓脈沖通過A/D轉(zhuǎn)換通入多通道分析儀（multi-channel analyzer）笑旺，在多
通道分析儀中，這些輸出脈沖被依次送入各通道中馍资，在對(duì)應(yīng)通道中計(jì)入一個(gè)信號(hào)筒主，表明檢測(cè)到壽命為該時(shí)間的一個(gè)光子，經(jīng)過幾十萬次
重復(fù)之后，各個(gè)通道累計(jì)的光子數(shù)不同乌妙，從而就獲得了與原始波形一致的直方圖使兔，由于在某一時(shí)間間隔之內(nèi)檢測(cè)到光子的幾率與熒光發(fā)
射強(qiáng)度成正比，所以該直方圖可以表征熒光強(qiáng)度衰減的規(guī)律冠胯，據(jù)此我們可以得到該樣品的熒光壽命火诸。
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