光學(xué)顯微鏡主要由目鏡、物鏡灾锯、載物臺(tái)和反光鏡組成，它能觀察到人眼無法分辨的微觀世jie顺饮，物鏡將樣品成放大的實(shí)像吵聪，它是直接與
顯微鏡的性能息息相關(guān)的。
顯微物鏡的基本參數(shù)
1.數(shù)值孔徑
數(shù)值孔徑可反映光學(xué)系統(tǒng)能夠收集的光的角度范圍兼雄，數(shù)值孔徑表示物鏡焦面處收光角度的大小吟逝。它簡(jiǎn)寫為NA君旦，它由物鏡和待測(cè)樣品之間介質(zhì)折射率(n)與物鏡孔徑角的一半(θ/2)的正弦值的乘積決定，可表示成：NA=n×sinθ/2嘲碱。其中n為物鏡中透鏡工作介質(zhì)的折射率（如空氣的折射率是1.0金砍，水的折射率是1.33，油類的折射率則可高達(dá)1.56）麦锯。θ則是光進(jìn)出透鏡時(shí)一半的Z大角度恕稠，或者可以表述為是從物在光軸上一點(diǎn)到光闌邊緣的光線與光軸的夾角扶欣。由于數(shù)值孔徑的定義中考慮了折射率的因素鹅巍，因此一束光在通過平面由一種介質(zhì)進(jìn)入另一種時(shí)千扶，數(shù)值孔徑仍是一個(gè)常量。在空氣中骆捧，透鏡的孔徑角大小近似等于數(shù)值孔徑的兩倍（在近軸近似的條件下）澎羞。數(shù)值孔徑是相對(duì)于物或像上的特定一點(diǎn)而言的，因此其大小也會(huì)隨著該點(diǎn)的移動(dòng)而改變妆绞。在顯微學(xué)領(lǐng)域，如不特加注明枫攀，數(shù)值孔徑一般是針對(duì)物一側(cè)而言的括饶。
2.焦深
物鏡的焦深為物鏡對(duì)表面較為不平的樣品仍能夠清晰成像能力的參數(shù)，當(dāng)物鏡準(zhǔn)確聚焦于某一樣品表面時(shí)来涨，如果位于該表面前面及后面的物面仍然能被觀察清晰图焰，則該兩前后平面間的距離就是焦深。物鏡的焦深主要取決于物鏡的數(shù)值孔徑蹦掐，數(shù)值孔徑越大技羔，焦深越小。在物鏡的數(shù)值孔徑特別大時(shí)笤闯，顯微鏡能有非常好的分辨率堕阔，但焦深會(huì)很小。因此要根據(jù)實(shí)際需要選擇數(shù)值孔徑合適的物鏡颗味。當(dāng)顯微鏡用于高倍觀察時(shí)超陆，由于焦深小浦马，只有在樣品表面高低差別很小時(shí)能清晰成像时呀。
3.齊焦距離
齊焦距離是指對(duì)準(zhǔn)焦點(diǎn)時(shí)的物鏡鏡體定位面到物體表面的距離。齊焦距離的國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)明確為45 mm晶默。也有個(gè)別廠家會(huì)用60 mm的齊焦距離谨娜。這種非標(biāo)準(zhǔn)的，還不很完善的系統(tǒng)由于光路設(shè)計(jì)比較長(zhǎng)磺陡，光損失比較大（光損失是以u(píng)m為單位計(jì)算的，尤其在熒光應(yīng)用領(lǐng)域廣泛）币他。45 mm的齊焦設(shè)計(jì)可以在Z短光程的基礎(chǔ)上實(shí)現(xiàn)高分辨率坞靶，高視場(chǎng)亮度的效果。
4.工作距離
物鏡的工作距離是指顯微鏡準(zhǔn)確聚焦至樣品表面后蝴悉，待測(cè)樣品表面與物鏡的Z前端表面之間的距離彰阴。物鏡的放大率越高，工作距離越短拍冠。使用時(shí)尿这，待測(cè)樣品應(yīng)位于物鏡的一到二倍焦距之間簇抵。因此，它和焦距是兩個(gè)不同的參數(shù)射众，顯微鏡調(diào)焦的步驟實(shí)際是在調(diào)節(jié)物鏡的工作距離碟摆。在物鏡數(shù)值孔徑一定的情況下，工作距離短责球，孔徑角則大焦履。數(shù)值孔徑大的高倍物鏡雏逾，其工作距離小嘉裤。
5.分辨率
分辨率是指能清晰的分辨待測(cè)樣品表面兩點(diǎn)間的Z小距離，通常用d表示栖博。分辨率決定了顯微鏡分辨樣品上細(xì)節(jié)的程度屑宠。顯微鏡的物鏡是使物體放大成實(shí)像，目鏡的可以讓物鏡的實(shí)像再次放大仇让，所以目鏡只會(huì)放大物鏡能分辨的細(xì)節(jié)，物鏡不能分辨的細(xì)節(jié)丧叽，不可能通過目鏡放大而變得可分辨卫玖。因此顯微鏡的分辨率主要取決于物鏡的分辨率。
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